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WRN[C727A](Heterozygous,AF%:50) Isogenic HCT116

CBP75082

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產(chǎn)品描述
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I. Background
      WRN(威納綜合征蛋白)是由人類 WRN 基因編碼的一種多功能核酶,屬于 RecQ DNA 解旋酶家族的核心成員,同時具備 3'→5' DNA 解旋酶活性和 3'→5' DNA 外切酶/核酸 酶活性,并擁有獨特的復制叉穩(wěn)定化功能。該蛋白通過其 N 端的解旋酶結構域、中央的外 切酶結構域及 C 端的 HRDC(解旋酶-RNaseD-C 末端)結構域協(xié)同作用,在維持基因組穩(wěn) 定性中扮演樞紐角色:它主導 DNA 復制叉的修復與重啟(尤其在復制壓力下防止新生鏈 降解)、促進端粒的同源重組(ALT)依賴性維持、協(xié)調(diào)同源重組修復(HR)的精準調(diào)控 (如 RAD51 介導的鏈入侵),同時參與非同源末端連接(NHEJ)和 堿基切除修復(BER) 等通路,以應對雙鏈斷裂、鏈間交聯(lián)及氧化損傷。其功能缺失性突變導致威納綜合征 (Werner syndrome),一種罕見的常染色體隱性遺傳早衰癥,患者多在青少年期后迅速呈 現(xiàn)衰老表型,包括白內(nèi)障、硬皮病樣皮膚萎縮、Ⅱ型糖尿病、骨質(zhì)疏松、動脈硬化及間充 質(zhì)來源惡性腫瘤(如肉瘤、甲狀腺癌)風險激增。近年研究進一步揭示,WRN 缺失在微衛(wèi) 星高度不穩(wěn)定(MSI-H)的實體瘤(如結直腸癌、胃癌)中可通過合成致死效應與 PARP 抑制劑 產(chǎn)生協(xié)同作用,成為極具潛力的精準治療靶點,相關臨床試驗已進入活躍階段。
 
II. Description
      WRN[C727A](Heterozygous,AF%:50) Isogenic HCT116 藥靶細胞,通過基 因編輯的方式將 WRN 的 727 位氨基酸胱氨酸(C)突變?yōu)楸彼幔ˋ)。



Figure 1. WRN[C727A](Heterozygous,AF%:50) Isogenic HCT116 原理示意圖
 
III. Introduction
Host Cell: HCT116
Expressed gene: WRN[C727A] 
Stability: 32 passages (in-house test, that not means the cell line will be instable beyond the passages we tested.)
Freeze Medium: 90% FBS+10% DMSO
Culture Medium: McCoy's 5a +10%FBS
Storage: Liquid nitrogen
 
IV. Representative Data
Figure 2. Sanger of WRN[C727A](Heterozygous,AF%:50) Isogenic HCT116


Figure 3. A:HCT116 Parental Cell;B:WRN[C727A](Heterozygous,AF%:50) Isogenic HCT116   通道2 藍色微滴代表WRN[C727A]突變陽性,通道2 綠色微滴代表該位點為陰性野生型



Figure 4. CTG Proliferation Assay of WRN[C727A](Heterozygous,AF%:50) Isogenic HCT116(1C12C6).



Figure 5. CTC Proliferation Assay of WRN[C727A](Heterozygous,AF%:50) lsogenic HCT116(1C12C6).

 

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